HPLC纯化检测服务

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统, 将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱, 在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。

高效液相色谱法有“四高一广”的特点:

①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
安徽快三 此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。

强耀生物色谱特点

  • 高压——压力可达150~300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。
  • 高速——流速为0.1~10.0 mL/min。
  • 高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
  • 高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。
  • HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:
  • 速度快——通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。
  • 分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。
  • 灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。
  • 色谱柱可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。
  • 样品量少,容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

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